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2023-06-24
一、实训目标
(1)掌握胃膜素的生产方法。
(2)掌握胃膜素的质量检验标准。(3)掌握一些相关仪器的使用方法。
二、实训原理
胃膜素是从猪胃黏膜中提取的一种以黏蛋白为主要成分的药物。其多糖组分含葡萄糖醛酸、甘露糖、乙酰氨基葡萄糖和乙酰氨基半乳糖。氨基己糖的总量为5%~8%。胃膜素着水后膨胀成为黏液,遇酸即沉淀,遇热不凝固,胃膜素水溶液能被60%以上乙醇或丙酮沉淀。胃膜素与酸较长时间作用,能分解成各种蛋白质和多糖成分。胃膜素的等电点为3.3~5。
胃膜素的工艺流程如图1-4-6所示。
图1-4-6 胃膜素的生产工艺流程
三、实训器材和试剂
1.原料
猪胃黏膜。
2.药品
3.仪器设备
耐酸锅、浓缩罐、真空干燥器。
四、胃膜素的生产
(1)消化:猪胃黏膜200 kg加蒸馏水120 kg和工业盐酸4 L左右,使pH为2.5~3.0,维持温度45~50℃,消化约3 h。
(2)脱脂、分层:消化液冷至30℃以下,加氯仿16 kg,充分搅拌,室温静置48 h以上。
(3)减压浓缩:将上清液吸入减压浓缩罐中,于35℃以下浓缩至原体积1/3左右(25℃时相对密度为1.15左右),得浓缩液,预冷至5℃以下。下层残渣回收氯仿。
(4)胃膜素的分离:将预冷至5℃以下的丙酮在搅拌下缓缓加入冷至5℃以下的浓缩液中,至相对密度为0.96~0.98,即有白色长丝状的胃膜素沉淀出来。静置20 h左右(5℃以下),捞取胃膜素,以适量的60%冷丙酮洗涤两次,然后用70%冷丙酮浸洗一次,70℃真空干燥,得胃膜素成品。
五、质量检验
(1)定性反应 鉴定肽键:胃膜素样品与双缩脲试剂反应显紫红色。鉴定还原性物质:胃膜素样品的酸水解液用碱中和后,与碱性酒石酸铜试剂加热反应,生成红色氧化亚铜沉淀。
(2)含量测定 胃膜素目前还没有统一的含量测定标准,一般通过测定样品黏度、总氮量及还原性物质来控制其质量。黏蛋白含氮量一般低于蛋白质的平均含氮量(16%),半微量凯氏定氮法测定胃膜素的含氮量为8.9%~10%,而其他还原性物质(主要是水解后生成的还原性糖)含量不低于25%。黏度反映了胃膜素分子的完整性。其黏度的高低与含氮量、还原性物质含量三者之间有一定的关系。黏度高则总氮量低、还原性物质含量高,其纯度一般也相应较高。胃膜素的奥氏黏度不低于1.3。
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