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【摘要】：不同种属的哺乳动物的生长激素之间有明显的种属特异性，只有灵长类的生长激素对人有活性。人生长激素分子稳定，其活性在冰冻条件下可保持数年，在室温下放置48 h无变化。图1-4-4生长激素生产工艺流程图二、工艺过程原料处理：动物死亡后立即将脑垂体取出，于干冰中速冻，-20℃保存。
一、生产前准备
（一）查找资料，了解生长激素的基本知识
人生长激素对人肝细胞有增加核分裂的作用，对人红细胞有抑制葡萄糖利用的作用，对人白细胞或淋巴细胞有促进蛋白质及核酸合成的作用，有促进骨骼、肌肉、结缔组织和内脏增长的作用。不同种属的哺乳动物的生长激素之间有明显的种属特异性，只有灵长类的生长激素对人有活性。
人的生长激素是由一条191个氨基酸的多肽链所构成的蛋白质，分子中有两个二硫键，相对分子质量为21700，等电点为4.9，沉降系数S20，W为2.179。N端的1～134氨基酸段肽链为活性所必需，C端的一段肽链可能起保护作用，使生长激素在血液循环中不致被酶所破坏。人生长激素分子稳定，其活性在冰冻条件下可保持数年，在室温下放置48 h无变化。
（二）确定生产技术、生产原料和工艺路线
（2）确定生产原料：垂体前叶。
（3）确定生长激素提取工艺流程，如图1-4-4所示。
图1-4-4 生长激素生产工艺流程图
二、工艺过程
（1）原料处理：动物死亡后立即将脑垂体取出，于干冰中速冻，-20℃保存。使用前用蒸馏水淋洗数次后，剥离前后叶。
（2）提取：取垂体前叶先加水，在pH5.5下，置组织捣碎机中匀浆，以水抽提，10000 r/min离心30 min。取沉淀用pH4.0、0.1 mol/L硫酸铵溶液抽提，同上离心后取沉淀再用pH5.5、0.25 mol/L硫酸铵溶液抽提，离心得上清液。
（3）分级沉淀：抽提液于pH7.5加饱和硫酸铵溶液至硫酸铵浓度为1 mol/L，离心后将沉淀弃去；上清液再加饱和硫酸铵溶液至1.8 mol/L，离心后得盐析物。
（4）透析：盐析物溶于少量蒸馏水中，对蒸馏水透析，得透析内液。
（5）等电点沉淀：将所得透析内液用HCl或NaOH分别依次于pH4.0和pH4.9进行等电点沉淀，离心除去沉淀，收集上清液。
（6）盐析：上清液于pH4.0加饱和硫酸铵溶液至1.25 mol/L盐析、离心，得沉淀物。
（7）凝胶过滤：将沉淀物溶于少量蒸馏水中，对含0.1 mol/L氯化钠的pH8.5的Tris-HCl缓冲液进行透析。透析内液上Sephadex G-75凝胶柱，用含0.1 mol/L氯化钠的50 mmol/L、pH8.5的Tris-HCl缓冲液进行洗脱，分步收集，生长激素活性存在于第2个峰中。
（8）DEAE-C（DE-52）层析：将活性峰部分对pH8.7、6.5 mmol/L的硼砂-盐酸缓冲液进行透析，透析内液上DEAE-C（DE-52）柱，用含0～0.3 mol/L氯化钠的6.5 mmol/L、pH8.7硼砂-盐酸缓冲液进行梯度洗脱，合并活性峰，脱盐，冻干，得生长激素。
（9）效价检验：生长激素的生物测定用鸽子嗉囊法及大白鼠尾骨法。
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