实验十蛋白质类药物的分离、纯化1.实验目的理解凝胶过滤层析法分离、纯化物质的基本原理。理论上凝胶过滤不涉及蛋白质与凝胶之间的吸附或排斥作用。凝胶过滤柱是由均匀装填的多孔凝胶微粒组成，不同蛋白质通过这些微孔的迁移能力不同，从而使蛋白质被分离。......
2023-12-07
蛋白质类药物的基础知识
【摘要】：蛋白质是生物大分子，相对分子质量变化范围很大，小者数千，大者数千万。高度不对称的分子和具有相同相对分子质量的球形蛋白质相比，具有较高的黏度。用此法可以鉴定蛋白质的存在或测定其含量。（二）蛋白质的药用价值蛋白质的药用价值列于表1-4-2中。
（一）蛋白质的结构、性质和种类
1.蛋白质的结构
蛋白质的基本化学组成是20种常用的L型α-氨基酸（甘氨酸和脯氨酸除外），平均含氮量为16%，这是蛋白质元素组成的一个特点，也是凯氏定氮法测定蛋白质含量的理论基础。有些蛋白质除蛋白质部分外，还有非蛋白成分，称为辅基或配基，这样的蛋白质称为结合蛋白质。蛋白质是生物大分子，相对分子质量变化范围很大，小者数千，大者数千万。其分子的大小已达到胶粒1～100 nm范围之内。
2.蛋白质的性质
（1）物理性质。
①沉降系数 对每一种均一性蛋白质而言，都可用几个沉降法相关物理常数来描述其分子的大小和形状。沉降系数（S）是指每单位引力场的沉降分子下降速度。它表示分子的大小特性，其数值受分子大小和形状的影响。在较小的离心作用下，大颗粒的沉降速度较快，沉降系数也大。
②摩擦系数 颗粒沉降时所受阻力与沉降速度成反比。分子越紧密，它在溶剂中的摩擦阻力就越小，沉降就越快；分子越不规则，摩擦阻力就越大，沉降就越慢。
③扩散常数 扩散常数是指单位浓度梯度、单位时间和单位扩散面积下扩散的量（D），与上述三种条件成正比。当温度和溶剂一定时，D值越大说明分子越小，越容易扩散。
④溶液的黏度 在一定溶质浓度下，溶液的黏度取决于溶质的相对分子质量和形状。高度不对称的分子和具有相同相对分子质量的球形蛋白质相比，具有较高的黏度。
（2）化学性质。
①两性解离与等电点 蛋白质分子至少具有一个游离氨基和一个游离羧基，因此蛋白质与氨基酸一样具有两性解离的性质。不过因为蛋白质所含的氨基酸种类和数目较多且有支链，是多价电解质，其解离情况远比氨基酸复杂。
②与茚三酮反应 与氨基酸一样，蛋白质也具有茚三酮反应，反应原理与氨基酸反应一样，该反应是蛋白质鉴定的重要依据。
③双缩脲反应 蛋白质中含有多个和双缩脲结构相似的肽键，因此，所有蛋白质及二肽以上的多肽都能与双缩脲试剂发生反应，形成紫红色或蓝紫色化合物。用此法可以鉴定蛋白质的存在或测定其含量。
④福林-酚反应 该方法是双缩脲法的发展，包括两步反应，首先在碱性溶液中与铜作用形成铜与蛋白质的配合物，然后这个配合物以及酪氨酸和色氨酸的残基还原磷钼酸-磷钨酸试剂（福林试剂），产生深蓝色混合物。该法比双缩脲法灵敏，但要花费较长时间。此法也适用于酪氨酸和色氨酸的定量测定，对那些含这两个残基与标准蛋白质差异较大的蛋白质有误差。
⑤紫外吸收 由于蛋白质中存在有共轭双键的酪氨酸、色氨酸和苯丙氨酸，因此蛋白质具有紫外吸收，以色氨酸吸收最强，吸收峰在280 nm波长处。
3.蛋白质类药物的种类
蛋白质类药物可分为蛋白质类激素、血浆蛋白、蛋白质类细胞生长调节因子、黏蛋白、胶原蛋白、碱性蛋白质、蛋白酶抑制剂等。
（1）蛋白质类激素 蛋白质类激素主要包括垂体蛋白质激素和促性腺激素。垂体蛋白质激素主要包括生长素（GH）、催乳激素（PRL）、促甲状腺素（TSH）、促黄体生成激素（LH）、促卵泡激素（FSH）等，其中生长素有严格的种属特性，动物的生长激素对人无效；促性腺激素主要包括人绒毛膜促性腺激素（HCG）、绝经尿促性腺激素（HMG）、血清促性腺激素（GTH）等；其他蛋白质类激素主要包括胰岛素、胰抗脂肝素、松弛素、尿抑胃素等。
（2）血浆蛋白 血浆蛋白中的主要蛋白质成分有白蛋白（Alb）、纤维蛋白溶酶原、血浆纤维结合蛋白（Fn）、免疫丙种球蛋白、抗淋巴细胞免疫球蛋白、抗D免疫球蛋白、抗HBs免疫球蛋白、抗血友病球蛋白、纤维蛋白原（Fg）、抗凝血酶Ⅲ、凝血因子Ⅷ、凝血因子Ⅳ等。不同物种间的血浆蛋白存在着种属差异，动物血虽然与人血蛋白结构非常相似，但不能用于人体。
（3）蛋白质类细胞生长调节因子 蛋白质类细胞生长调节因子主要包括干扰素α、β、γ（IDN），白细胞介素（1～16）（IL）、神经生长因子（NGF）、肝细胞生长因子（HGF）、血小板衍生的生长因子（PDGF）、肿瘤坏死因子（TNF）、集落刺激因子（CSF）、组织纤溶酶原激活因子（t-PA）、促红细胞生成素（EPO）、骨形态发生蛋白（BMP）等。
（4）黏蛋白 主要包括胃膜素、硫酸糖肽、血型物质A和B等。
（5）胶原蛋白 主要包括明胶、氧化聚合明胶、阿胶、冻干猪皮等。
（6）碱性蛋白质 主要包括硫酸鱼精蛋白。
（7）蛋白酶抑制剂 主要包括胰蛋白酶抑制剂、卵清蛋白酶抑制剂等。
（二）蛋白质的药用价值
蛋白质的药用价值列于表1-4-2中。
表1-4-2 蛋白质的药用价值
续表
有关生物制药工艺（第2版）的文章
- 详细阅读
-
酶类药物的特点与分类详细阅读
（一）酶类药物的特点酶类药物作为具有药理作用的特殊酶类，一般具有以下的特点。因此，对酶类药物，除了用通常采用的理化法检验外，还需用生物检定法进行检定，以证实其生物活性。酶类药物一般需进行效价测定或酶活力测定，以表明其有效成分含量的高低。（二）酶类药物的分类根据药用酶的临床应用，可将其分为以下几类。在一些由于特异性酶缺乏所引起的先天性代谢异常疾病的治疗中，药用酶的替代治疗是改善代谢紊乱的有效措施。......
2023-06-24
-
糖类药物的生产方法优化详细阅读
（二）多糖的生产多糖的生产包括提取、纯化、浓度的测定和纯度检查等环节。糖类遇浓硫酸脱水生成糠醛或其衍生物，可与蒽酮试剂结合产生颜色反应，反应后溶液呈蓝绿色，于620 nm波长处有最大吸收，吸光度与糖含量呈线性关系。......
2023-06-24
-
HTML基础知识总结详细阅读
DOCTYPE html ＞部分、＜html ＞标记、头部＜head ＞标记、主体＜body ＞标记三大部分，头部描述浏览器所需的信息，主体包含所要说明的具体内容，声明部分告知浏览器文档使用HTML 规范，如下所示：3.HTML52014 年10 月29 日，万维网联盟宣布HTML5 标准规范最终制定完成，并公开发布。设计HTML5 的目的是在移动设备上支持多媒体。......
2023-11-25
-
脂类药物的生产技术优化详细阅读
（一）直接提取法在生物体或生物转化反应体系中，有些脂类药物是以游离形式存在的，如卵磷脂、脑磷脂、花生四烯酸及前列腺素等。提取不稳定的脂类时，应尽量避免加热。（三）生物转化法生物转化法包括微生物发酵、动植物细胞培养和酶工程技术。例如：微生物发酵法或烟草细胞培养法生产辅酶Q10；紫草细胞培养用于生产紫草素；以花生四烯酸为原料，用类脂氧化酶-2为前列腺素合成酶的酶原，通过酶工程技术将原料转化合成前列腺素。......
2023-06-24
-
蛋白质功效比值及膳食优质蛋白质的重要性详细阅读
蛋白质功效比值是以体重增加为基础的方法，是指实验期内，动物平均每摄入1 g蛋白质时所增加的体重克数。在实际计算某种氨基酸评分时，首先将被测食物蛋白中必需氨基酸与参考蛋白质中的必需氨基酸进行比较，比值小于1者，为限制性氨基酸。为改善膳食蛋白质质量，在膳食中应保证有一定数量的优质蛋白质。类脂在体内相当稳定，不受营养状况及机体活动影响，故称为“固定脂”或“定脂”。......
2023-12-05
-
糖类药物的分类与来源解析详细阅读
（一）糖类药物的分类糖类药物种类繁多，其分类方法也有多种，按照所含糖基数目的不同可分为以下几种。（二）糖类药物的来源1.单糖及其衍生物的来源自然界已发现的单糖主要是戊糖和己糖。它们都是醛糖，以多糖或苷的形式存在于动植物中。微生物多糖的种类繁多，依生物来源分为细菌多糖、真菌多糖和藻类多糖，按分泌类型又可分为胞内多糖与胞外多糖。......
2023-06-24
-
黄酮类药物的生理活性探析详细阅读
黄酮类药物的生理活性表现在以下几个方面。抗肝脏毒作用从水飞蓟种子中得到的水飞蓟素等黄酮类化合物具有保肝作用，用于治疗急慢性肝炎、肝硬化及多种中毒性肝损伤。雌性激素样作用大豆素等异黄酮具有雌性激素样作用。清除人体自由基作用黄酮类化合物多具有酚羟基，易氧化成醌类而提供氢离子，故有显著的抗氧化特点。......
2023-06-24
相关推荐