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微生物接种技术在生物技术制药实验中的应用

【摘要】:实验三十一微生物接种技术1.实验目的了解接种前的准备工作,掌握各种接种方法。接种时,动作应准确迅速,注意无菌操作。细菌采用划线法接种,真菌采用菌块或孢子划线接种。

实验三十一微生物接种技术

1.实验目的

了解接种前的准备工作,掌握各种接种方法。

2.实验原理

微生物接种技术是生物学研究中最基本的操作技术。根据实验目的、培养基种类及容器等不同,所用接种方法也不相同,如斜面接种、液体接种、固体接种和穿刺接种等,以获得生长良好的纯种微生物。为此,接种必须在无杂菌污染的环境中进行,整个过程要求严格的无菌操作。同时,因接种方法的不同,常采用不同的接种工具,如接种环、接种针、移液管和玻璃涂棒等。

3.实验仪器和材料

大肠杆菌斜面,黑曲霉斜面,肉汤斜面,查氏培养基斜面,超净工作台。

4.实验步骤

(1)接种前的准备工作

5﹪的石炭酸喷雾,拖地;75﹪乙醇擦拭台面,将所有接种物品先放入超净工作台内,打开超净工作台风机和紫外灯,预热、杀菌30分钟。

(2)接种

75﹪乙醇擦手。接种时,动作应准确迅速,注意无菌操作。细菌采用划线法接种,真菌采用菌块或孢子划线接种。每人接细菌斜面(大肠杆菌)和真菌(黑曲霉)斜面各一只。(标上日期、时间、姓名)(www.chuimin.cn)

(3)培养

细菌斜面37℃培养1天,真菌斜面28℃培养2天,观察是否染菌。

5.注意事项

(1)所有接种物品应一次性放入超净工作台内。

(2)超净工作台内物品不可堆放太满,酒精灯与进风口之间不可放置高大器皿,以免影响接种效果。

(3)接种过程中,打开盖15分钟的营养琼脂平板,在盖上盖后于37℃培养24~28小时,平板内菌落数不超过4个,此时可认为接种室内无菌程度良好。

6.思考题

(1)接种前为什么超净工作台要预热30分钟?

(2)接种前后为什么要灼烧接种环(钩)?

(3)操作过程中可能会出现什么问题?如何解决?